El citómetro FACSCanto II es un sistema de fluídica acoplado a una óptica avanzada que permite la caracterización de células/partículas en suspensión (tamaño máximo de partícula recomendado: 50 µm) en función de su capacidad para dispersar o emitir luz cuando se exponen a fuentes de luz (láseres) a longitudes de onda específicas. Los datos resultantes se recogen para múltiples parámetros para cada célula individual a alta velocidad (hasta miles de células/partículas por segundo). Por ejemplo, el ciclo celular, múltiples poblaciones y fenotipos de células inmunes o la expresión de un reportero fluorescente pueden ser evaluados y cuantificados con precisión para un gran número de células en minutos o incluso segundos.

La configuración óptica del FACSCanto II consta de tres láseres diferentes: 405 nm (violeta), 488 nm (azul) y 633 nm (rojo). La emisión de fluorescencia se filtra (véase más adelante) y luego se amplifica mediante 8 detectores de tubo fotomultiplicador. Entre paréntesis se indican ejemplos de fluoróforos y proteínas fluorescentes adecuados para estudios con las siguientes combinaciones de láser y filtro disponibles en el FACSCanto II.

Rangos de longitud de onda detectados a partir del láser de 488 nm:
– 750-810 nm (por ejemplo, PE-Cy7)
– 670-735 nm (PerPC-Cy5,5)
– 564-606 nm (PE)
– 515-545 nm (FITC, GFP)

Rangos de longitud de onda detectados con láser de 633 nm:
– 750-810 nm (APC-Cy7)
– 650-670 nm (APC)

Rangos de longitud de onda detectados con láser de 405 nm:
– 502-535 nm (AmCyan)
– 425-475 nm (DAPI, Pacific Blue ®)

Detección de dispersión frontal: Fotodiodo con filtro de paso de banda 488/10
Detección de dispersión lateral: PMT con filtro de paso de banda 488/10

Las aplicaciones comunes de este aparato incluyen:

• Detección de antígenos celulares específicos (de superficie, citoplasmáticos, nucleares)
• Caracterización del ADN celular: proliferación celular, cambios en la diploidía
• Estado funcional de las células: viabilidad, apoptosis, necrosis, segundos mensajeros y producción de radicales libres.

  Contacto: Lourdes Renart (e-mail: teléfono: 966658440).